HSC細胞慢病毒轉(zhuǎn)導工藝
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了han ran細胞的類型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒han ran的xian zhu特點是han ran個體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,大多經(jīng)歷長達數(shù)年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 來源的一種病毒載體,慢病毒載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有han ran力的病毒顆粒,通過han ran細胞或huo ti組織,實現(xiàn)外源基因在細胞或huo ti組織中表達。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,歡迎咨詢上海曼博生物!慢病毒轉(zhuǎn)導的特點是什么呢?HSC細胞慢病毒轉(zhuǎn)導工藝
Sirion Biotech GmbH 公司于2007年在德國馬丁雷德成立,此后一直致力于改變病毒載體供應(yīng)的模式。Sirion載體被用于基因功能研究、臨床前靶點驗證、基因zhi liao和疫苗開發(fā)。Sirion Technologies獲得了歐洲和美國幾項主要臨床試驗(Phase I/II/III)的許可,是歐洲主要的病毒載體技術(shù)商業(yè)供應(yīng)商,在短時間內(nèi)可提供quan mian的定制病毒載體組合,并提供個性化項目管理服務(wù)。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導效率。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中,并有相關(guān)藥物已上市銷售。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio提高慢病毒轉(zhuǎn)導試劑盒國內(nèi)做慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑的公司有哪些呢?
人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導可誘導長期轉(zhuǎn)基因表達,并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導效率的試劑,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導增強劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標準生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉(zhuǎn)導研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio
近幾年LentiBOOST作為一種無毒性的化學轉(zhuǎn)導增強劑guang fan引起關(guān)注。LentiBOOST通過與細胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,提高轉(zhuǎn)導效率。研究證實LentiBOOST在不影響轉(zhuǎn)導細胞存活、增殖及分化能力的前提下,提高小鼠T細胞、HSCs和人HSCs的慢病毒轉(zhuǎn)導效率。在異種移植后免疫缺陷小鼠體內(nèi),LentiBOOST使再植HSCs的VCN增加2倍,且對細胞分化和植入無影響。LentiBOOST在對人T細胞無細胞毒作用的情況下可增強慢病毒轉(zhuǎn)導產(chǎn)生更多的Zhong Liu抗原特異性TCR-T細胞,且轉(zhuǎn)導后的 T細胞仍能分泌TNF及IFN-γ,并對抗原陽性的腫瘤細胞具有明顯的細胞毒作用,這一發(fā)現(xiàn)為ai zheng的基因zhi liao提供新的優(yōu)化策略。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導增強劑相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章!慢病毒轉(zhuǎn)染可以使用哪些試劑呢?
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慢病毒轉(zhuǎn)染有什么限制?HSC細胞慢病毒轉(zhuǎn)導工藝
產(chǎn)品特點1.增強慢病毒轉(zhuǎn)導效率,可高達90%—提高zhi liao蛋白表達量,有利于取得臨床試驗成功2.減少MOI低至2倍,從而降低COGS(Costofgoodssold)——減少Lentivirus的用量和物料成本3.控制單個細胞中的病毒載體拷貝數(shù)(VCN,VirusCopyNumber)——符合FDA/EMA對ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)產(chǎn)品的安全標準4.易于使用——無需改變現(xiàn)有轉(zhuǎn)導流程,兼容已經(jīng)開發(fā)流程5.提供研究級和GMP級——GMP級具有臨床試驗的所有必備文件6.30多種應(yīng)用LentiBOOST的藥物已在美國和歐洲進入臨床試驗(PhaseIII和PhaseI/II)階段——加速了IND文件歸檔.更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!HSC細胞慢病毒轉(zhuǎn)導工藝
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