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忻州市鑫源人力資源服務(wù)有限公司

申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲(chǔ)存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過(guò)濾,儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過(guò)濾(0.2μm濾膜)后儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細(xì)胞分盤:通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)量好?申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!?全球PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝幫助用戶更好地了解PEI轉(zhuǎn)染試劑的操作流程分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.

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1.對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物。?如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!

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PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái),經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開(kāi)研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強(qiáng)。PEIMAX是一種非GMP等級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無(wú)菌試劑,采用0.1μmPES無(wú)菌過(guò)濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn)。適用于工藝開(kāi)發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!轉(zhuǎn)染效率好的PEI轉(zhuǎn)染試劑是哪個(gè)品牌?天津高實(shí)用性PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

MAXgene GMP是一種cGMP級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑。申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定檢測(cè)時(shí)間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!近期還可申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝!申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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    74 人參與回答
最佳回答
上海不銹鋼油煙管尺寸

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6、 等 81 人贊同該回答

6、無(wú)氫脆、無(wú)溫度危害,可保證材料力學(xué)性能不變;7、可代替部分需熱鍍鋅的工藝;8、耐腐蝕性好,中性鹽霧試驗(yàn)達(dá)240小時(shí);9、采用熱鍍鋅方法完成,適用于各種強(qiáng)酸、堿霧氣等強(qiáng)腐蝕環(huán)境中10、可根據(jù)客戶要求 。

四川圣邦微單片機(jī)
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第1樓
單片 等 75 人贊同該回答

單片機(jī)的基本概念與原理介紹單片機(jī)的定義、工作原理、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和基本功能,幫助讀者了解單片機(jī)的基本概念和特點(diǎn)。單片機(jī)的應(yīng)用領(lǐng)域與優(yōu)勢(shì)闡述單片機(jī)在各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用,如工業(yè)控制、智能家居、汽車電子、醫(yī)療設(shè)備等 。

湖北噴管吹灰器價(jià)格
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第2樓
91 等 65 人贊同該回答

91MW循環(huán)流化床電站鍋爐具有燃料適應(yīng)廣、燃燒效率高、氮氧化物排放低、低成本石灰石爐內(nèi)脫硫、負(fù)荷適應(yīng)性強(qiáng)、可燃用劣質(zhì)燃料等突出優(yōu)點(diǎn)。對(duì)于減輕燃煤電站對(duì)大氣環(huán)境的污染起到了很好的作用,可切實(shí)有效地保護(hù)西 。

神經(jīng)剝離子/器孔鏡器械
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第3樓
環(huán)鋸 等 29 人贊同該回答

環(huán)鋸手術(shù)器械在神經(jīng)外科手術(shù)中具有廣泛的應(yīng)用。例如,在腦瘤切除手術(shù)中,環(huán)鋸手術(shù)器械可以快速準(zhǔn)確地切除病變組織,減少對(duì)周圍正常組織的損傷,提高手術(shù)效果。在血管瘤切除手術(shù)中,環(huán)鋸手術(shù)器械也可以精確地控制切割 。

廣東新西蘭兔原代肝細(xì)胞種類
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第4樓
原代 等 47 人贊同該回答

原代肝細(xì)胞也廣泛應(yīng)用于嵌合體肝模型當(dāng)中。通過(guò)將正常人原代肝細(xì)胞移植到患有嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的肝特異uPA轉(zhuǎn)基因小鼠中,可以成功地構(gòu)建嵌合體肝。而轉(zhuǎn)基因小鼠的uPA表達(dá)能夠促使鼠肝細(xì)胞死亡,從 。

桐廬縣生物金相顯微鏡批發(fā)
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第5樓
工業(yè) 等 34 人贊同該回答

工業(yè)用金相顯微鏡是一種專業(yè)的顯微鏡,普遍應(yīng)用于金屬材料的檢測(cè)、分析和研究。在使用金相顯微鏡進(jìn)行樣品觀察時(shí),照明系統(tǒng)是非常重要的一個(gè)組成部分。照明系統(tǒng)可以提供光源,使樣品在顯微鏡下呈現(xiàn)出清晰的圖像。同時(shí) 。

福建景觀雕塑制品游樂(lè)設(shè)備廠家
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第6樓
游樂(lè) 等 73 人贊同該回答

游樂(lè)設(shè)備的安全問(wèn)題是一個(gè)重要的話題,特別是對(duì)于孩子們來(lái)說(shuō)。在游樂(lè)場(chǎng)、公園、社區(qū)和家庭等場(chǎng)所,孩子們經(jīng)常使用各種游樂(lè)設(shè)備進(jìn)行娛樂(lè)和活動(dòng)。然而,這些設(shè)備的安全性卻常常被忽視,導(dǎo)致意外事故的發(fā)生。首先,對(duì)于 。

廣西不銹鋼閘閥廠家
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第7樓
介質(zhì) 等 78 人贊同該回答

介質(zhì)和彈簧力推動(dòng)上游閥座、緊貼閘板達(dá)到密封,使介質(zhì)不會(huì)滲漏至中腔,從而形成上游密封,同時(shí)閥座O形圈與閥體凹槽面對(duì)面形成緊密的密封,防止閥座背面介質(zhì)泄漏。電動(dòng)平板閘閥的自動(dòng)泄壓:當(dāng)閘閥中腔壓力異常升高至 。

鄭州吊機(jī)車包車服務(wù)
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第8樓
大件 等 53 人贊同該回答

大件貨物服務(wù)的特點(diǎn)是需要進(jìn)行專業(yè)的包裝、裝卸、運(yùn)輸和安裝。這些貨物通常需要進(jìn)行特殊的包裝,以保護(hù)它們?cè)谶\(yùn)輸過(guò)程中不受損壞。在裝卸過(guò)程中,需要使用專業(yè)的設(shè)備和工具,以確保貨物的安全和穩(wěn)定。在運(yùn)輸過(guò)程中, 。

鹽城工業(yè)整機(jī)定做廠家
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第9樓
工業(yè) 等 73 人贊同該回答

工業(yè)顯示器通過(guò)提供可視化的工業(yè)信息和服務(wù),為工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程提供了重要的指導(dǎo)和決策依據(jù)。以下是幾個(gè)方面的具體應(yīng)用:1. 實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)展示:工業(yè)顯示器可以實(shí)時(shí)展示各種生產(chǎn)數(shù)據(jù),包括設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)、生產(chǎn)數(shù)量、質(zhì)量數(shù) 。

崇明區(qū)噴漆離心式空氣壓縮機(jī)銷售代理
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第10樓
靜音 等 83 人贊同該回答

靜音無(wú)油空壓機(jī)特點(diǎn):更高的產(chǎn)氣量:是指單位功率下壓縮空氣排量,這是非常重要的指標(biāo),用戶在選擇時(shí)要多做比較。同功率下產(chǎn)氣量更高的說(shuō)明機(jī)器設(shè)計(jì)更科學(xué),更環(huán)保節(jié)能,同時(shí)穩(wěn)定性和持久性會(huì)更好。排氣壓力:按行業(yè) 。

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